記者在Addgene網(wǎng)站中看到,新版實(shí)驗(yàn)方法分為細(xì)胞培養(yǎng)、質(zhì)粒/gDNA共轉(zhuǎn)染、基因組提取三個部分,一些實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)與其在《自然-生命科學(xué)》中發(fā)表的論文有所不同。
據(jù)“科學(xué)美國人”中文版《環(huán)球科學(xué)》的微信公眾號“科普圈”介紹,新實(shí)驗(yàn)步驟有幾處改變,其中包括“血清品牌由Hyclone變更為Gibco”,“溶解和稀釋質(zhì)粒及gDNA的緩沖液變更為水(pH8.0)”,“建議在質(zhì)粒/gDNA共轉(zhuǎn)染的8小時、12小時或24小時后,補(bǔ)轉(zhuǎn)一次gDNA(舊版方法中只提及了‘24小時’)”等內(nèi)容。
此外,韓春雨還在新版實(shí)驗(yàn)方法中列出了4項(xiàng)注意事項(xiàng),其中包括“NgAgo/gDNA系統(tǒng)對細(xì)胞中胞內(nèi)菌和支原體感染敏感,在實(shí)驗(yàn)前要仔細(xì)確認(rèn)所使用的細(xì)胞株未被污染或污染已被徹底清除”等細(xì)節(jié)。
8月8日,《自然》雜志網(wǎng)站發(fā)表一篇報道,詳細(xì)記述了多國科學(xué)家對于韓春雨的NgAgo的爭論。文章指出,來自澳大利亞、西班牙等國的科研人員表示實(shí)驗(yàn)不可重復(fù),另有一些科學(xué)家表示曾重復(fù)出韓春雨的部分實(shí)驗(yàn),但還需進(jìn)一步確認(rèn)。
記者留意到,在Addgene網(wǎng)站上,一名英國愛丁堡再生醫(yī)學(xué)中心的分子生物學(xué)家普然·得瓦瑞(PooranDewari)發(fā)表一篇博客,對此事進(jìn)行了一次在線調(diào)查。截至記者發(fā)稿,有9人聲稱在應(yīng)用NgAgo系統(tǒng)后觀察到了基因剪切跡象,100人聲稱無法觀察到基因剪切,84人表示需要進(jìn)一步實(shí)驗(yàn);9人聲稱觀察到基因插入跡象,47人聲稱無法觀察到基因插入,137人稱還需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。
據(jù)悉,5月2日,韓春雨這位河北科技大學(xué)副教授在國際知名學(xué)術(shù)期刊《自然-生物技術(shù)》上發(fā)表文章,并提出一種新的基因編輯手段——NgAgo。NgAgo被人認(rèn)為是對現(xiàn)有的CRISPR技術(shù)提出了挑戰(zhàn),有媒體報道時稱,這是一個“具有顛覆性的第四代基因編輯技術(shù)”。但此后不久,該事件陷入持續(xù)性爭論,多國科學(xué)家質(zhì)疑其基因組編輯結(jié)果無法重復(fù)。
8月2日,《自然-生物技術(shù)》發(fā)表聲明稱,“已有若干研究者聯(lián)系本刊,表示無法重復(fù)這項(xiàng)研究。本刊將按照既定流程來調(diào)查此事。作為在自然科研旗下期刊發(fā)表論文的條件之一,作者須將材料、數(shù)據(jù)、代碼和相關(guān)的實(shí)驗(yàn)流程及時向讀者提供,不可加以不當(dāng)限制。”
北京一位不愿透露姓名的生物科學(xué)領(lǐng)域?qū)<腋嬖V記者,在《自然-生物技術(shù)》得出調(diào)查結(jié)果之前,誰也不能說韓春雨造假,影響生物科學(xué)實(shí)驗(yàn)的成功與否有很多原因?!斑@樣的情況還是耐心等雜志的調(diào)查結(jié)果吧?!?br/>
面對質(zhì)疑,韓春雨告訴記者:“不回應(yīng)就是最好的回應(yīng)?!?/p>
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